細胞培養(yǎng)的being之旅
2023-07-03 | 文章(zhāng)來源: | 點擊(jī)率:
細胞是生物學領域研究的重要(yào)材料,而細胞培養是指在體外提(tí)供穩定(dìng)的培養環境(jìng)使細胞健康生長、穩定繁殖的方法。
細胞的培養流程並不複雜,但有(yǒu)人形容說,細胞培養需(xū)要(yào)像關心孩子一樣,否(fǒu)則稍不留神就“鬧點脾氣”:細胞汙染、活力不(bú)佳,或漸漸就不是(shì)原來的樣子。
我們(men)要講是,細胞(bāo)培養(yǎng)的being之旅。
準備工作
無菌操作是細胞培養成功的關鍵因素,所以須(xū)穿上隔離服或(huò)專用的白大(dà)衣,戴上一次性手套和口罩,換上專用一次性拖鞋。細胞培養操作前進行台麵、器皿(mǐn)消毒,務必用75%的酒精(jīng)擦(cā)拭(shì)生物安全櫃(being,BBC-A2係列)的操作台麵,然後將櫃內紫外燈打開照射30分鍾左右進行滅菌,再開(kāi)始(shǐ)培養操作。

細胞複蘇
細胞複蘇遵守“慢(màn)凍快融”的(de)原則,細胞凍存管(guǎn)從液氮(being,BYDS係列)或(huò)超低溫冰箱(being,BDW-86L係列)中取出後,通過PE手套,迅速放入37℃水浴(being,BW係列)中輕輕搖動融(róng)化約1min。離心處(chù)理後加入培養基接種至培養瓶/培養皿中。
細胞培養
將含有細胞的培(péi)養瓶/培(péi)養皿放入CO2培養箱(being,BIO-RHP、BIO-RHP Pro係列)中,將參數調節到適當的溫度(37℃),適當的氣(qì)體濃度(CO2氣體(tǐ)濃度5%),在培養箱底部或放置的水盤中加入超純水保證箱體內相對應的濕度,開始細胞培養,培養過程中要定時觀察細胞培養情況。

通常情況下,細胞(bāo)培養過程中發生汙染後,需將汙染的細胞丟棄,並對(duì)CO2培養箱進行消(xiāo)毒滅(miè)菌,防止汙染源進一步擴(kuò)散造成更大的汙染。
所以保證培養環境的穩定,是細胞培養成功的重要因素。
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